中文字幕久精品视频在线,日韩欧美在线综合网另类,天天综合天天综合色在线,55夜色66夜色国产精品视频

當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  新型實(shí)時(shí)NAT檢測(cè)法:高效、精準(zhǔn)識(shí)別細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染

新型實(shí)時(shí)NAT檢測(cè)法:高效、精準(zhǔn)識(shí)別細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染

更新時(shí)間:2024-08-16  |  點(diǎn)擊率:527

細(xì)胞系的支原體污染是一種常見的情況,可能以多種方式影響細(xì)胞系的行為。支原體污染通常不明顯,因此應(yīng)經(jīng)常檢測(cè)細(xì)胞系。市面上有幾種用于支原體檢測(cè)的試劑盒,但歐洲藥典培養(yǎng)方法可能需要數(shù)周時(shí)間才能產(chǎn)生結(jié)果,仍被認(rèn)為是“金標(biāo)準(zhǔn)"方法。因此,需要具有相當(dāng)靈敏度、特異性和物種范圍的快速替代方法。在這里,我們描述了一種內(nèi)部控制的基于Taqman的實(shí)時(shí)PCR檢測(cè),用于細(xì)胞培養(yǎng)基,無(wú)需DNA提取。該測(cè)定可以檢測(cè)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)物中最常見的支原體污染物的不到 10 CFU。經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的檢測(cè)方法有可能用作基于細(xì)胞培養(yǎng)的生物制品生產(chǎn)中的常規(guī)測(cè)試。

 

在一項(xiàng)研究中,科研人員描述了一種新的實(shí)時(shí)檢測(cè)方法,該方法使用56PCR引物的混合物直接從培養(yǎng)基中有效擴(kuò)增多種支原體種類,而無(wú)需進(jìn)行DNA提取。實(shí)時(shí)分析由Taqman探針介導(dǎo)至高度保守區(qū)域。使用另一種標(biāo)記的Taqman探針至工程基因組DNA模板,以促進(jìn)對(duì)抑制物質(zhì)的管內(nèi)控制。該方法顯示出高特異性、敏感性和檢測(cè)準(zhǔn)確性。該方法有可能符合歐洲藥典(Ph. Eur.2.6.7對(duì)于基于NAT的支原體檢測(cè)的要求,因此可能是對(duì)用于生物制品生產(chǎn)的細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)測(cè)試的廉價(jià)、簡(jiǎn)單且有效的替代方法。

 

歷史估計(jì)細(xì)胞系中支原體污染的發(fā)生率高達(dá)35%,但現(xiàn)在支原體污染受到的關(guān)注比以前更多了,因此這一估計(jì)可能過(guò)高了。然而,最近對(duì)DNA序列數(shù)據(jù)庫(kù)的計(jì)算機(jī)分析發(fā)現(xiàn),美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心(NCBI)序列讀取檔案中嚙齒動(dòng)物和靈長(zhǎng)類動(dòng)物條目的11%被支原體序列污染,1000基因組項(xiàng)目中的樣本至少有7%被支原體污染,但尚不清楚污染是來(lái)自細(xì)胞培養(yǎng)還是實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)處理步驟。

 

本研究的主要目的是提供驗(yàn)證數(shù)據(jù),以支持使用新開發(fā)的廣譜單管NAT(核酸擴(kuò)增技術(shù))檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)物中支原體污染的方法??蒲腥藛T還尋求確定該檢測(cè)方法與傳統(tǒng)的瓊脂培養(yǎng)法(被廣泛認(rèn)為是支原體檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn))相比,其性能是否相當(dāng)。該研究使用德國(guó)MB公司生產(chǎn)的支原體檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行試驗(yàn)。

 


久久变态刺激另类sm孕妇| 加勒比五月丁香一区二区| 九九视频这里只有精品98| 真实国产乱子伦在线观看 | 午夜免费片在线观看不卡| 91亚洲国产成人精品一区| 中文字幕 日韩精品在线| 2021在线视频精品网| 国产自产精品自在线观看| 一本大道在线一本久道少妇| 九九经典在线精品视频热| 久久人人做人人玩人精品| 日产国产精品亚洲系列| 国产精品岛国片在线观看| 国产女爽爽视频精品免费| 99e这里只有精品视频| 97久久草草超级碰碰碰| a一级黄色片久久久久久| 午夜.dj高清在线观看免费7| 国产一区二区三区bb片| 老牛嫩草一区二区三区| 欧美a片在线观看高清版| 国精品少妇人人爽人人爽| 国产精品138| 亚洲特黄色片一区二区三区| 中文字幕日韩电影在线播放| 久久免费看少妇a级黄片| 大鸡巴猛插小穴在线观看| 韩国一区二区三区精品视频| 91久久久国产精品福利| 午夜精品999| 男人天堂网av在线播放| 国产网红无码精品福利网| 久久被窝电影亚洲爽爽爽| 亚洲电影网一区二区三区| 丰满熟女少妇一区二区三区| 久久久久久高清无码视频| 欧美成综合伊人98精品| 久久久久久久黄色小视频| 噜噜久久噜噜久久噜噜久久| 高清av电影在线免费观看|